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NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）酯和其他活化酯（磺基-NHS、磺基四氟苯基-STP）是適合氨基修飾的反應(yīng)性化合物。NHS是最常見的活化酯類型。常見的修飾是熒光標記、熒光猝滅劑和其他報告基團。可以使用活化酯連接炔烴和疊氮基，以使生物分子適應(yīng)點擊化學(xué)。尤其常見的是蛋白質(zhì)和肽的修飾，因為它們幾乎總是含有氨基。其他例子是氨基寡核苷酸的修飾、氨基修飾的DNA和含氨基的糖。NHS酯與氨基的反應(yīng)強烈依賴于pH值：在低pH值下，氨基被質(zhì)子化，并且不會發(fā)生修飾。在高于最佳pH值時，NHS酯的水解速...

硫醇與馬來酰亞胺的反應(yīng)是廣泛用于生物共軛和標記生物分子（包括蛋白質(zhì)和肽）的過程。它按照以下方案進行：馬來酰亞胺是對硫醇表現(xiàn)出高選擇性的親電子化合物。雖然馬來酰亞胺在自然界中幾乎不存在，但硫醇卻非常豐富。它們以半胱氨酸殘基形式存在于蛋白質(zhì)和肽中。盡管天然DNA不含硫醇，但具有硫醇基團的合成寡核苷酸可以很容易地制備。硫醇易于氧化二聚并形成二硫鍵。因此，半胱氨酸殘基形成二硫鍵，從而穩(wěn)定蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)。二硫化物不與馬來酰亞胺反應(yīng)。因此，有必要在綴合前還原二硫化物并排除反應(yīng)中的氧氣。...

Pico488DNA定量溶液是一種超靈敏試劑，用于在無法通過測量260nm吸光度來確定雙鏈DNA濃度時測量雙鏈DNA濃度。Pico488選擇性地結(jié)合雙鏈DNA，因此核苷酸、單鏈DNA、RNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)不會妨礙測量。與雙鏈DNA結(jié)合的染料在503nm處最大吸收光并在525nm處最大發(fā)射光。為了檢測測定讀數(shù)，可以使用任何類型的熒光計或熒光板讀數(shù)器。Pico488測量DNA濃度的線性范圍為1pg/μL—5ng/μL。為了實現(xiàn)精確、可重復(fù)的熒光測量，我們建議在TE緩沖液（10...

點擊化學(xué)緩沖液適用于含有炔烴的寡核苷酸的合成后綴合。帶有末端炔的寡核苷酸可以使用炔亞磷酰胺合成，或者您也可以在我們的網(wǎng)站上訂購修飾寡核苷酸的合成。疊氮化物與修飾寡核苷酸的末端炔綴合，形成五元雜環(huán)。這兩個基團（疊氮基和炔烴）在天然生物分子中都極為罕見，因此該反應(yīng)具有高度特異性，可以有效地處理各種任務(wù)。該反應(yīng)在銅(I)存在下、中性pH值下進行。催化緩沖液含有銅(II)、醋酸三乙銨pH7和DMSO。建議使用新配制的抗壞血酸溶液來還原銅(II)。對于此反應(yīng)，您將需要炔烴修飾的寡核苷酸...

蛋白質(zhì)標記緩沖液適用于CuAAC與蛋白質(zhì)的反應(yīng)，可保護生物分子免受活性氧的損害。該反應(yīng)可用于具有炔烴或疊氮基團的蛋白質(zhì)，以及用疊氮基團代謝標記的細胞或細胞裂解物的組分。疊氮化物與末端炔烴綴合，形成五元雜環(huán)（1,2,3-三唑）。這兩個基團（疊氮基和炔烴）在天然生物分子中都極為罕見，因此該反應(yīng)具有高度特異性，可以有效地處理各種任務(wù)。該反應(yīng)在銅(I)化合物存在下進行，幾乎不依賴于pH值。蛋白質(zhì)標記緩沖液針對蛋白質(zhì)操作進行了優(yōu)化，含有銅(II)鹽（催化活性銅(I)化合物的穩(wěn)定前體）、...

細胞增殖測定廣泛應(yīng)用于細胞毒性研究、癌癥研究和細胞生物學(xué)的許多其他領(lǐng)域。其中許多可以通過熒光標記對增殖細胞進行可視化，并且適合高通量篩選。檢測復(fù)制的DNA可以說是檢測增殖的最直接方法。這是通過使用溴脫氧尿苷(BrdU)核苷實現(xiàn)的，該核苷在復(fù)制過程中融入DNA。然后，細胞DNA中的這些核苷修飾可以通過抗BrdU抗體檢測到。盡管具有特異性，但這種測定方法繁瑣且難以重現(xiàn)，因為需要用刺激性試劑處理細胞，以使DNA暴露于抗體，否則這些抗體不會穿透細胞結(jié)構(gòu)。一種更溫和的替代方案是乙炔基脫...